Esta revista contendra prácticas realizadas en laboratorio sobre la materia de Bacteriología a nivel Licenciatura, se observaran pruebas y medios para su crecimiento

Revista de Bacteriología

Bacterias: un mundo increible

ALCANTAR YOLANDA, DEL CALLEJO RAÚL

La infección del tracto urinario (ITU) consiste en la colonización y multiplicación microbiana, habitualmente bacteriana, a lo largo del trayecto del tracto urinario. Se denomina pielonefritis si afecta al riñón y la pelvis renal, cistitis si implica a la vejiga, utetritis si afecta a la uretra y prostatitis si la infección se localiza en la próstata(1).

● Son más frecuentes en el sexo femenino: hasta un 50 % de las mujeres puede presentar una ITU a lo largo de su vida, lo que se relaciona con la actividad sexual, los embarazos y la edad.

● En el varón las ITU tienen dos picos de incidencia: durante el primer año de vida y en mayores de 50 años, en relación con la presencia de patología prostática o manipulaciones urológicas.

Bacterias en Vías Urinarias

Figura 1.Aparato urinario masculino y femenino

Figura 2. Procedimiento a seguir en la elaboración de un Urocultivo para la búsqueda de bacterias en orina.

Metodología.

 

1.- Limpieza de los genitales.

2.- Obtención de muestra (orina), tranportarla y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre y CLED por          siembra masiva.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y          microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y                observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

 

Figura 4. Método para obtención de orina en varones.

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos y habilidades necesarias para una toma de muestra de orina                 correctamente.

- Adquirir conocimientos y habilidades para realizar una siembra de la muestra                   correctamente   y observar un crecimiento bacteriano.

- Realizar las pruebas bioquímicas pertinentes para descubrir al antígeno que crecio en        mis medios.

Bacterias en Vías Urinarias

Figura 5. Método para obtención de orina en damas.

Figura 3. Medio de transporte para muestra de orina. Se muestran los datos que debe contener el frasco.

Resultados.

 

Fecha de siembra: 08/Septiembre/2016

Nombre del paciente: Yolanda Alcantar

Medios utilizados.

Agar Sangre: Desarrollo bacteriano de 20 UFC.

CLED: Desarrollo bacteriano de 7 UFC

Figura 7. CLED, 7 UFC.

Bacterias en Vías Urinarias

Morfología Microscópica.

 

Morfología Macroscópica.

-Color                 Blanco

-Tamaño             2mm 

-Hemólisis          No presenta

-Orilla                 Redonda

-Superficie          Plana

Figura 8. Cocos en racimo Gram (+) 

Figura 6. Agar Sangre 20 UFC

Las pruebas bioquímicas se emplean para identificar de forma clara y precisa, la presencia o ausencia de una enzima, de un grupo de enzimas, o de una vía metabólica completa en uno o más microorganismos(4).

  • La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
  • La oxidasa determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN'N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta como color azul.

Pruebas Bioquímicas

Bibliografía.

1.- Wein, Alan J.,(2008), Urología, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Espinosa Román L: Infección urinaria. En García Nieto V y Santos F. (Ed) "Nefrología Pedíátrica". pp 205-215. Aula Médica Ediciones. Madrid. 2000.

3.-Revista de Nefrología(actualizacion 11/08/2016) Infecciones de tracto urinario. Sitio web: http://www.revistanefrologia.com/es-monografias-nefrologia-dia-pdf-monografia-4

4.- Protocólo de prácticas de laboratorio de microbiología experimental. UNAM. Sitio web: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Practica6.2PruebasBioquimicas_21633.pdf

Conclusiones.

 

Las infecciones en vías urinarias son consideradas como aquellas que no merecen un estudio afondo debido a que la mayoria de las personas no lo concideran como tal una enfermedad alarmante. Con el estudio se logra afirmar que una de la bacteriaes un Staphylococcus, el cual se encuentra en piel pero puede ser transmitida por tener relaciones sexuales o un contacto accidental y por alguna deficiencia en el sistema inmune éste puede comenzar una propagación originando una infección grave.

Figura 9. Prueba de catalasa positiva, se observa la formación de burbujas.

Bacterias en Vías Urinarias

Figua 10. Prueba de Oxidasa negativa, el botón permanece intacto sin ninguna alteración.

La mucosa vaginal tiene una flora microbiana normal, cuyo conocimiento y consideración debe tenerse en cuenta a la hora del estudio microbiológico de infecciones vaginales. Se pueden considerar tres situaciones:

- Saber cuándo se altera el equilibrio de esta flora colonizante.

- Búsqueda de agentes exógenos, transmitidos normalmente por vía sexual.

- Detección de portadoras de determinados microorganismos.

El exudado vaginal es remitido al laboratorio para el diagnóstico de vaginitis, una inflamación de la vagina, y vaginosis, una alteración del equilibrio de la flora vaginal sin inflamación. La infección vaginal es frecuentemente la causa de molestias en la mujer adulta y los síntomas de vaginitis son los síntomas de índole ginecológico que con más frecuencia ven ginecólogos y médicos de atención primaria.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 1. Aparato Reproductor Femenino

Figura 2. Ejemplo de toma de muestra para posterior examen en fresco

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos sobre como realizar un correcto Exudado vaginal.

- Saber como tratar la muestra para un posteriro análisis y siembra de la muestra.

-Identificar los microorganismos ubicados en vagina y diferenciar entre patógenos y no patógenos.

Metodología.

 

1.- Limpieza de los genitales.

2.- Obtención de muestra (exudado vaginal), tranportarla en un medio semi-sólido y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre, Chocolate y Mc Conkey por estría cruzada.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y  observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 3. Medio de transporte semi-sólido para muestras de exudado vaginal.

Figura 4. Toma adecuada de muestra para la obtención de un exudado vaginal

Resultados.

Fecha de siembra: 22/Septiembre/2016

Medios utilizados.

Agar Chocolate: Desarrollo bacteriano de mas de 100 UFC.

McConkey: Desarrollo bacteriano de mas de 100 UFC

 

Morfología Macroscópica.

-Color                 Rosa mexiano

-Tamaño             1mm 

-Hemólisis          No presenta

-Orilla                  Redonda

-Superficie          Plana

-Consistencia     Viscosa

Morfología Microscópica.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 6. Bacilos aislados Gram (-)

Figura 5. McConkey Mas de 100 UFC

Pruebas Bioquímicas

Figura 7. Prueba de catalasa positivo por presencia de burbujas en la superficie.

Figura 9. Lactosa (+), Glucosa (+), Producción de Ácido Sulfídrico

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 10. Desaminación y descarboxilación de lisina (-)

Figura 8. Prueba de oxidasa negativa.

Figura 12. Movilidad (+), Ornitina (-), Indol (-)

Figura 11. Azul citrato (+)

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Marcelo T de Arveolar,(2008). Medicina Interna, 2da Edición, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

3.- Exudado vaginal. Sitio web: http://www.aefa.es/wp-content/uploads/2014/04/Manejo-del-exudado-vaginal-.pdf

Conclusiones.

 

Las infecciones que se encuentran en estudios de cultivos sobre exudado vaginal deben de realizarce de manera correcta para no arrojar resultados erroneos por contaminación o confundirlo con microbiota normal del organismo, en nuestro caso se determino que la bacteria presente se trataba de Citrobacter freundii,, se puede encontrar presente como microbiota normal, en el agua o al momento de hacer una mala limpieza de heces puede llegar a alojarse en vagina ocacionando pocos problemas de no tan relevancia médica.

Bacterias en Exudado Vaginal

El examen bacteriológico de las heces sirve para identificar gérmenes patógenos normalmente ausentes en el tubo digestivo y que pueden provocar diarreas e infecciones digestivas en el individuo. 
Por tanto, este examen pretende detectar la presencia de gérmenes o bacterias perjudiciales como la salmonela, la bacteria Shigella, la bacteria Campylobacter, la bacteria Escherichia coli (conocida por su abreviación E. coli) o la bacteria Vibrio cholerae. 
Estas afecciones provocan la aparición de síntomas como los dolores de estómago, vómitos, fiebre, diarreas y diarreas agudas, crónicas, febriles o no. El enfermo afectado por diarreas emite heces líquidas, viscosas o hemorrágicas. 

Bacterias en Coprocultivo

Figura 1. Razones por las que se manda a hacer un Coprocultivo en el laboratorio.

Figura 2. Bacterias presentes en el intestino grueso de los humanos.

Objetivo.

- Saber la manera correcta en la que se debe de realizar un cultivo de heces en el laboratorio.

- Aprender a identificar entre microbiota normal que se pueda encontrar en las heces e identificar una posible bacteria patógena.

- Saber que medio de cultivo ayudan al crecimiento de bacterias presentes en heces.

Metodología.

 

1.- Obtención de heces.

2.- Tranportarla y etiquetarla de manera adecuada

3.- Sembrar en Gelosa sangre, Agar Sal y Manitol, Gelosa Chocolate y E.M.B.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

 

Figura 3. Pasos para procesar en el laboratorio una muestra de heces, tanto cultivos como muestras vistas al microscopio.

Bacterias en Coprocultivo

  COLONIA 1 
ARREGLO AGAR CHOCOLATE
GRAM BACILOS GRAM NEGATIVOS
METABOLISMO MICROBIANO
   
  COLONIA 1
CATALASA  NEGATIVO
OXIDASA NEGATIVO
RESISTENCIA: CRECEN EN CITRATO

Figura 5. Agar Chocolate Mas de 100 UFC

MORFOLOGIA COLONIAL 

 

 
MEDIO DE CULTIVO: Gelosa sangre y Gelosa Chocolate, 
   
  COLONIA 1
TAMAÑO PEQUEÑOS
COLOR BLANCOS
FORMA CIRCULAR 
ELEVACION PLANOS
SUPERIFICIE  GRANDES
ASPECTO CONCAVA
BORDE SIN BORDES DEFINIDOS
CONSISTENCIA MUCOSOS
   

Resultados.

 

 

Bacterias en Coprocultivo

Figura 6. Bacilos aislados Gram (-)

 

Figura 4. Gelosa sangre Mas de 100 UFC

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.-Indicaciones y valoración clínica del urocultivo y coprocultivo. Sitio web:http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Urocultivo_coprocultivo_indicaciones_Medicine2010.pdf

3.- Hemocultivo, Coprocultivo y Reacción de Widal en la detección de Salmonella Entérica en pacientes con Salmonelosis. Sitio web: http://rmedicina.ucsg.edu.ec/archivo/9.3/RM.9.3.05.pdf

METABOLISMO MICROBIANO
   
  COLONIA 1
CATALASA  POSITIVO
OXIDASA NEGATIVO
RESISTENCIA:  -----
BACITROCINA  -----
NOVOBIOCINA  ----- 
PRODUCCION COAGULASA  ----- 

Conclusiones.

Las infecciones originadas por bacterias encontradas en un coprocultivo son de gran importancia pues entre estas se encuentran varias que nos pueden indicar un deficit en el funcionamiento de nuestro sistema inmune, para un estudio mas detallado se puede estudiar la morfología de las heces y posteriormente un coprocultivo para hacer el estudio mas específico. En el caso de este estudio y por los resultados obtenidos concluimos que la bacteria es una Salmonella que si bien es considerada de carácter de gran importancia se encontró que en bajas cantidades como lo es este caso puede haber sido adquirida por la ingesta de algun alimento mal cocinado pero no ocasiono problemas de importancia para el paciente por lo cual se descarta un problema mayor.

 

Pruebas Bioquímicas

Bacterias en Coprocultivo

Figura 7. Prueba de catalasa positiva por presencia de gas notable.

El exudado faríngeo es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar organismos que puedan causar una infección en la garganta. El diagnóstico de laboratorio correcto y oportuno depende del cuidado con que se realice la toma y manejo de la muestra siguiendo a detalle las instrucciones al respecto. La interpretación del resultado del laboratorio debe estar apoyado por un buen diagnóstico clínico y los antecedentes epidemiológicos del caso. La muestra para aislamiento de agentes infecciosos debe ser tomada ANTES de instaurar la terapia con antimicrobianos. La muestra debe identificarse incluyendo todos los datos relevantes del caso: nombre completo o clave, diagnóstico presuntivo, fecha de toma y tipo de muestra.

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 1. Partes que conforman la garganta humana

Figura 2. Diferencias entre una garganta sana y una con posible infección bacteriana

Metodología.

 

1.- No aseo bucal y en ayunas (indicaciones).

2.- Obtención de muestra por medio de un hisopo raspar lo mas profundo de la garganta (sin provocar el vomito), tranportarla y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre y McConkey  por medio de una siembra con hisopo y despues con asa en estría masiva.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y          microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y                observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos adecuados de como obtener una muestra de exudado faringeo correcta.

- Diferenciar entre microbiota normal de la garganta contra posibles infecciones originadas por bacterias.

-Conocer medios de cultivo útiles para el crecimiento idóneo de bacterias provenientes de un exudado faringeo.

Figura 4. Parte en donde se debe de realizar la toma de muestra con hisopo

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 3. Forma correcta de como se debe obtener la muestra para un exudado faringeo

Figura 5. Forma de extendido de la muestra con el hisopo en el medio

 MORFOLOGÍA COLONIAL 

 

COLONIA 1

TAMAÑO

GRANDES

COLOR 

ROSAS

FORMA 

REDONDAS

ELEVACION 

PLANAS

SUPERIFICIE  

GRANDES

ASPECTO 

CONCAVA

BORDE 

SIN BORDE DEFINIDO
CONSISTENCIA MUCOSAS 

Resultados.

MEDIOS DONDE SE SEMBRO LA BACTERIA Y LOS RESULTADOS OBTENIDOS
KLIEGERL LACTOSA (+) GLUCOSA (+)  PRODUCCION  DE ACIDO SULFIDRICO (-) GASES (-)
LIA DESCARBOXILACION  GAS (-)    
CITRATO DE SIMMONS CITRATO (+)      
MIO PRESENCIA DE GAS (++) MOVILIDAD INDOL  AMARILLO, ALO AMARILLO (+)  

 

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 7 y 8. Pruebas bioquímicas antes (izquierda) y despues (derecha) de la siembra de la bacteria (interpretar resultados en la tabla superior)

Figura 6. McConkey 60 UFC

Conclusiones.

 

Infecciones encontradas en un exudado faringeo deben de manejarse con gran cuidado pues no queremos confundir una posible patologia con la microbiota normal de nuestro cuerpo, las bacterias que se encuentran alli no suelen ser dañinas para nuestro cuerpo pero si presentamos alguna baja en nuestras defensas esto podría ocacionar una posible infección. La bacteria encontrada fue Klebsiella oxytoca la cual es un bacilo gram (-), esta bacteria puede ser adquirida por estar en un ambiente poco salubre o con varias enfermedades como en un hospital pero a diferencia de otras no es considerada como de gran importancia medica a menos que la persona sea diabética o este tratada con antibióticos.

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Espinosa Román L: Infecciónes faringeas. En García Nieto V y Santos F. (Ed)Aula Médica Ediciones. Madrid. 2000.

3.-“Descripción del desempeño laboral del Q.F.B. dentro del laboratorio clínico del HGZ 58 en el análisis de cultivos faríngeos”. Sitio web: http://avalon.cuautitlan2.unam.mx/biblioteca/tesis/278.pdf

4.- Procedimiento para la toma y envío de muestras para diagnóstico de Influenza Sitio web: http://cvsp.cucs.udg.mx/drupal6/documentos/cursoinfluenza/documentos/t6/8muestras.pdf

Morfología microscópica

Figura 9. Bacilos aislados Gram (-)

Bacterias en Exudado Faríngeo