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Esta revista contendra prácticas realizadas en laboratorio sobre la materia de Bacteriología a nivel Licenciatura, se observaran pruebas y medios para su crecimiento

Revista de Bacteriología

Bacterias: un mundo increible

ALCANTAR YOLANDA, DEL CALLEJO RAÚL

La infección del tracto urinario (ITU) consiste en la colonización y multiplicación microbiana, habitualmente bacteriana, a lo largo del trayecto del tracto urinario. Se denomina pielonefritis si afecta al riñón y la pelvis renal, cistitis si implica a la vejiga, utetritis si afecta a la uretra y prostatitis si la infección se localiza en la próstata(1).

● Son más frecuentes en el sexo femenino: hasta un 50 % de las mujeres puede presentar una ITU a lo largo de su vida, lo que se relaciona con la actividad sexual, los embarazos y la edad.

● En el varón las ITU tienen dos picos de incidencia: durante el primer año de vida y en mayores de 50 años, en relación con la presencia de patología prostática o manipulaciones urológicas.

Bacterias en Vías Urinarias

Figura 1.Aparato urinario masculino y femenino

Figura 2. Procedimiento a seguir en la elaboración de un Urocultivo para la búsqueda de bacterias en orina.

Metodología.

 

1.- Limpieza de los genitales.

2.- Obtención de muestra (orina), tranportarla y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre y CLED por          siembra masiva.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y          microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y                observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

 

Figura 4. Método para obtención de orina en varones.

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos y habilidades necesarias para una toma de muestra de orina                 correctamente.

- Adquirir conocimientos y habilidades para realizar una siembra de la muestra                   correctamente   y observar un crecimiento bacteriano.

- Realizar las pruebas bioquímicas pertinentes para descubrir al antígeno que crecio en        mis medios.

Bacterias en Vías Urinarias

Figura 5. Método para obtención de orina en damas.

Figura 3. Medio de transporte para muestra de orina. Se muestran los datos que debe contener el frasco.

Resultados.

 

Fecha de siembra: 08/Septiembre/2016

Nombre del paciente: Yolanda Alcantar

Medios utilizados.

Agar Sangre: Desarrollo bacteriano de 20 UFC.

CLED: Desarrollo bacteriano de 7 UFC

Figura 7. CLED, 7 UFC.

Bacterias en Vías Urinarias

Morfología Microscópica.

 

Morfología Macroscópica.

-Color                 Blanco

-Tamaño             2mm 

-Hemólisis          No presenta

-Orilla                 Redonda

-Superficie          Plana

Figura 8. Cocos en racimo Gram (+) 

Figura 6. Agar Sangre 20 UFC

Las pruebas bioquímicas se emplean para identificar de forma clara y precisa, la presencia o ausencia de una enzima, de un grupo de enzimas, o de una vía metabólica completa en uno o más microorganismos(4).

  • La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
  • La oxidasa determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN'N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta como color azul.

Pruebas Bioquímicas

Bibliografía.

1.- Wein, Alan J.,(2008), Urología, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Espinosa Román L: Infección urinaria. En García Nieto V y Santos F. (Ed) "Nefrología Pedíátrica". pp 205-215. Aula Médica Ediciones. Madrid. 2000.

3.-Revista de Nefrología(actualizacion 11/08/2016) Infecciones de tracto urinario. Sitio web: http://www.revistanefrologia.com/es-monografias-nefrologia-dia-pdf-monografia-4

4.- Protocólo de prácticas de laboratorio de microbiología experimental. UNAM. Sitio web: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Practica6.2PruebasBioquimicas_21633.pdf

Conclusiones.

 

Las infecciones en vías urinarias son consideradas como aquellas que no merecen un estudio afondo debido a que la mayoria de las personas no lo concideran como tal una enfermedad alarmante. Con el estudio se logra afirmar que una de la bacteriaes un Staphylococcus, el cual se encuentra en piel pero puede ser transmitida por tener relaciones sexuales o un contacto accidental y por alguna deficiencia en el sistema inmune éste puede comenzar una propagación originando una infección grave.

Figura 9. Prueba de catalasa positiva, se observa la formación de burbujas.

Bacterias en Vías Urinarias

Figua 10. Prueba de Oxidasa negativa, el botón permanece intacto sin ninguna alteración.

La mucosa vaginal tiene una flora microbiana normal, cuyo conocimiento y consideración debe tenerse en cuenta a la hora del estudio microbiológico de infecciones vaginales. Se pueden considerar tres situaciones:

- Saber cuándo se altera el equilibrio de esta flora colonizante.

- Búsqueda de agentes exógenos, transmitidos normalmente por vía sexual.

- Detección de portadoras de determinados microorganismos.

El exudado vaginal es remitido al laboratorio para el diagnóstico de vaginitis, una inflamación de la vagina, y vaginosis, una alteración del equilibrio de la flora vaginal sin inflamación. La infección vaginal es frecuentemente la causa de molestias en la mujer adulta y los síntomas de vaginitis son los síntomas de índole ginecológico que con más frecuencia ven ginecólogos y médicos de atención primaria.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 1. Aparato Reproductor Femenino

Figura 2. Ejemplo de toma de muestra para posterior examen en fresco

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos sobre como realizar un correcto Exudado vaginal.

- Saber como tratar la muestra para un posteriro análisis y siembra de la muestra.

-Identificar los microorganismos ubicados en vagina y diferenciar entre patógenos y no patógenos.

Metodología.

 

1.- Limpieza de los genitales.

2.- Obtención de muestra (exudado vaginal), tranportarla en un medio semi-sólido y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre, Chocolate y Mc Conkey por estría cruzada.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y  observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 3. Medio de transporte semi-sólido para muestras de exudado vaginal.

Figura 4. Toma adecuada de muestra para la obtención de un exudado vaginal

Resultados.

Fecha de siembra: 22/Septiembre/2016

Medios utilizados.

Agar Chocolate: Desarrollo bacteriano de mas de 100 UFC.

McConkey: Desarrollo bacteriano de mas de 100 UFC

 

Morfología Macroscópica.

-Color                 Rosa mexiano

-Tamaño             1mm 

-Hemólisis          No presenta

-Orilla                  Redonda

-Superficie          Plana

-Consistencia     Viscosa

Morfología Microscópica.

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 6. Bacilos aislados Gram (-)

Figura 5. McConkey Mas de 100 UFC

Pruebas Bioquímicas

Figura 7. Prueba de catalasa positivo por presencia de burbujas en la superficie.

Figura 9. Lactosa (+), Glucosa (+), Producción de Ácido Sulfídrico

Bacterias en Exudado Vaginal

Figura 10. Desaminación y descarboxilación de lisina (-)

Figura 8. Prueba de oxidasa negativa.

Figura 12. Movilidad (+), Ornitina (-), Indol (-)

Figura 11. Azul citrato (+)

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Marcelo T de Arveolar,(2008). Medicina Interna, 2da Edición, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

3.- Exudado vaginal. Sitio web: http://www.aefa.es/wp-content/uploads/2014/04/Manejo-del-exudado-vaginal-.pdf

Conclusiones.

 

Las infecciones que se encuentran en estudios de cultivos sobre exudado vaginal deben de realizarce de manera correcta para no arrojar resultados erroneos por contaminación o confundirlo con microbiota normal del organismo, en nuestro caso se determino que la bacteria presente se trataba de Citrobacter freundii,, se puede encontrar presente como microbiota normal, en el agua o al momento de hacer una mala limpieza de heces puede llegar a alojarse en vagina ocacionando pocos problemas de no tan relevancia médica.

Bacterias en Exudado Vaginal

El examen bacteriológico de las heces sirve para identificar gérmenes patógenos normalmente ausentes en el tubo digestivo y que pueden provocar diarreas e infecciones digestivas en el individuo. 
Por tanto, este examen pretende detectar la presencia de gérmenes o bacterias perjudiciales como la salmonela, la bacteria Shigella, la bacteria Campylobacter, la bacteria Escherichia coli (conocida por su abreviación E. coli) o la bacteria Vibrio cholerae. 
Estas afecciones provocan la aparición de síntomas como los dolores de estómago, vómitos, fiebre, diarreas y diarreas agudas, crónicas, febriles o no. El enfermo afectado por diarreas emite heces líquidas, viscosas o hemorrágicas. 

Bacterias en Coprocultivo

Figura 1. Razones por las que se manda a hacer un Coprocultivo en el laboratorio.

Figura 2. Bacterias presentes en el intestino grueso de los humanos.

Objetivo.

- Saber la manera correcta en la que se debe de realizar un cultivo de heces en el laboratorio.

- Aprender a identificar entre microbiota normal que se pueda encontrar en las heces e identificar una posible bacteria patógena.

- Saber que medio de cultivo ayudan al crecimiento de bacterias presentes en heces.

Metodología.

 

1.- Obtención de heces.

2.- Tranportarla y etiquetarla de manera adecuada

3.- Sembrar en Gelosa sangre, Agar Sal y Manitol, Gelosa Chocolate y E.M.B.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

 

Figura 3. Pasos para procesar en el laboratorio una muestra de heces, tanto cultivos como muestras vistas al microscopio.

Bacterias en Coprocultivo

  COLONIA 1 
ARREGLO AGAR CHOCOLATE
GRAM BACILOS GRAM NEGATIVOS
METABOLISMO MICROBIANO
   
  COLONIA 1
CATALASA  NEGATIVO
OXIDASA NEGATIVO
RESISTENCIA: CRECEN EN CITRATO

Figura 5. Agar Chocolate Mas de 100 UFC

MORFOLOGIA COLONIAL 

 

 
MEDIO DE CULTIVO: Gelosa sangre y Gelosa Chocolate, 
   
  COLONIA 1
TAMAÑO PEQUEÑOS
COLOR BLANCOS
FORMA CIRCULAR 
ELEVACION PLANOS
SUPERIFICIE  GRANDES
ASPECTO CONCAVA
BORDE SIN BORDES DEFINIDOS
CONSISTENCIA MUCOSOS
   

Resultados.

 

 

Bacterias en Coprocultivo

Figura 6. Bacilos aislados Gram (-)

 

Figura 4. Gelosa sangre Mas de 100 UFC

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.-Indicaciones y valoración clínica del urocultivo y coprocultivo. Sitio web:http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Urocultivo_coprocultivo_indicaciones_Medicine2010.pdf

3.- Hemocultivo, Coprocultivo y Reacción de Widal en la detección de Salmonella Entérica en pacientes con Salmonelosis. Sitio web: http://rmedicina.ucsg.edu.ec/archivo/9.3/RM.9.3.05.pdf

METABOLISMO MICROBIANO
   
  COLONIA 1
CATALASA  POSITIVO
OXIDASA NEGATIVO
RESISTENCIA:  -----
BACITROCINA  -----
NOVOBIOCINA  ----- 
PRODUCCION COAGULASA  ----- 

Conclusiones.

Las infecciones originadas por bacterias encontradas en un coprocultivo son de gran importancia pues entre estas se encuentran varias que nos pueden indicar un deficit en el funcionamiento de nuestro sistema inmune, para un estudio mas detallado se puede estudiar la morfología de las heces y posteriormente un coprocultivo para hacer el estudio mas específico. En el caso de este estudio y por los resultados obtenidos concluimos que la bacteria es una Salmonella que si bien es considerada de carácter de gran importancia se encontró que en bajas cantidades como lo es este caso puede haber sido adquirida por la ingesta de algun alimento mal cocinado pero no ocasiono problemas de importancia para el paciente por lo cual se descarta un problema mayor.

 

Pruebas Bioquímicas

Bacterias en Coprocultivo

Figura 7. Prueba de catalasa positiva por presencia de gas notable.

El exudado faríngeo es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar organismos que puedan causar una infección en la garganta. El diagnóstico de laboratorio correcto y oportuno depende del cuidado con que se realice la toma y manejo de la muestra siguiendo a detalle las instrucciones al respecto. La interpretación del resultado del laboratorio debe estar apoyado por un buen diagnóstico clínico y los antecedentes epidemiológicos del caso. La muestra para aislamiento de agentes infecciosos debe ser tomada ANTES de instaurar la terapia con antimicrobianos. La muestra debe identificarse incluyendo todos los datos relevantes del caso: nombre completo o clave, diagnóstico presuntivo, fecha de toma y tipo de muestra.

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 1. Partes que conforman la garganta humana

Figura 2. Diferencias entre una garganta sana y una con posible infección bacteriana

Metodología.

 

1.- No aseo bucal y en ayunas (indicaciones).

2.- Obtención de muestra por medio de un hisopo raspar lo mas profundo de la garganta (sin provocar el vomito), tranportarla y etiquetarla de manera adecuada.

3.- Sembrar en Agar Sangre y McConkey  por medio de una siembra con hisopo y despues con asa en estría masiva.

4.- Incubar.

5.- Observar crecimiento bacteriano.

6.- Observar morfología macroscópica y          microscópica.

7.- Realizar frotis, tinción de Gram y                observar al microscopio.

8.- Realizar pruebas bioquímicas.

Objetivo.

- Adquirir los conocimientos adecuados de como obtener una muestra de exudado faringeo correcta.

- Diferenciar entre microbiota normal de la garganta contra posibles infecciones originadas por bacterias.

-Conocer medios de cultivo útiles para el crecimiento idóneo de bacterias provenientes de un exudado faringeo.

Figura 4. Parte en donde se debe de realizar la toma de muestra con hisopo

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 3. Forma correcta de como se debe obtener la muestra para un exudado faringeo

Figura 5. Forma de extendido de la muestra con el hisopo en el medio

 MORFOLOGÍA COLONIAL 

 

COLONIA 1

TAMAÑO

GRANDES

COLOR 

ROSAS

FORMA 

REDONDAS

ELEVACION 

PLANAS

SUPERIFICIE  

GRANDES

ASPECTO 

CONCAVA

BORDE 

SIN BORDE DEFINIDO
CONSISTENCIA MUCOSAS 

Resultados.

MEDIOS DONDE SE SEMBRO LA BACTERIA Y LOS RESULTADOS OBTENIDOS
KLIEGERL LACTOSA (+) GLUCOSA (+)  PRODUCCION  DE ACIDO SULFIDRICO (-) GASES (-)
LIA DESCARBOXILACION  GAS (-)    
CITRATO DE SIMMONS CITRATO (+)      
MIO PRESENCIA DE GAS (++) MOVILIDAD INDOL  AMARILLO, ALO AMARILLO (+)  

 

Bacterias en Exudado Faríngeo

Figura 7 y 8. Pruebas bioquímicas antes (izquierda) y despues (derecha) de la siembra de la bacteria (interpretar resultados en la tabla superior)

Figura 6. McConkey 60 UFC

Conclusiones.

 

Infecciones encontradas en un exudado faringeo deben de manejarse con gran cuidado pues no queremos confundir una posible patologia con la microbiota normal de nuestro cuerpo, las bacterias que se encuentran alli no suelen ser dañinas para nuestro cuerpo pero si presentamos alguna baja en nuestras defensas esto podría ocacionar una posible infección. La bacteria encontrada fue Klebsiella oxytoca la cual es un bacilo gram (-), esta bacteria puede ser adquirida por estar en un ambiente poco salubre o con varias enfermedades como en un hospital pero a diferencia de otras no es considerada como de gran importancia medica a menos que la persona sea diabética o este tratada con antibióticos.

Bibliografía.

1.- Guillem Prats,(2007), Microbiología Clínica, 9a Edicion, Editorial: Panamericana, México, D.F., México.

2.- Espinosa Román L: Infecciónes faringeas. En García Nieto V y Santos F. (Ed)Aula Médica Ediciones. Madrid. 2000.

3.-“Descripción del desempeño laboral del Q.F.B. dentro del laboratorio clínico del HGZ 58 en el análisis de cultivos faríngeos”. Sitio web: http://avalon.cuautitlan2.unam.mx/biblioteca/tesis/278.pdf

4.- Procedimiento para la toma y envío de muestras para diagnóstico de Influenza Sitio web: http://cvsp.cucs.udg.mx/drupal6/documentos/cursoinfluenza/documentos/t6/8muestras.pdf

Morfología microscópica

Figura 9. Bacilos aislados Gram (-)

Bacterias en Exudado Faríngeo

 

El nombre genérico de "Traumatología", que define aquella parte de la medicina que se dedica al estudio de las lesiones del aparato locomotor es en la actualidad insuficiente, ya que esta especialidad se extiende mucho más allá del campo de las lesiones traumáticas, abarcando también el estudio de aquellas congénitas o adquiridas, en sus aspectos preventivos, terapéuticos, de rehabilitación y de investigación, y que afectan al aparato locomotor desde el niño hasta la senectud.

Actualmente en muchos países se usa el nombre de "Ortopedia" para referirse al estudio de las enfermedades del tronco y las extremidades, pero la tradición del uso de la palabra "traumatología" hace que la palabra "ortopedia" excluya las lesiones traumáticas.

 

Traumatología

Imagen 1. Indicación por medio de puntos rojos lugares donde se ocasionan roturas.

Objetivo.

- Identificar por medio de siembra en diferentes agares, la aplicación de pruebas bioquímicas si lo requiere y la aplicación de antibiogramas la bacteria que se nos fue entregada en un medio de transporte desconociendo todo solo se tenia como hecho que provenia de Traumatología.

 

Metodología.

 

1.- Tomar la muestra del medio de transporte que se nos otorgo y etiquetarlo con los datos respectivos.

2.- Sembrar en Agar sangre, McConkey, Biggy y Sal y Manitol por estría cruzada.

3.- Incububar a 37 C por 24 horas

4.- Observar crecimiento bacteriano.

5.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

6.- Realizar frotis, tinción de Gram y observar al microscopio.

8.- Realizar las pruebas que se nos indique con la determinación de la bacteria.

Traumatología

Imagen 2. Muestra de como hacer una correcta siembra en estría cruzada.

MORFOLOGÍA COLONIAL EN EL MEDIO DE SAL Y MANITOL

  • Forma de colonia: circular
  • Bordes: enteros
  • Elevación: Convexa
  • Superficie: lisa
  • Consistencia: cremosa
  • Color: Blanco
  • *Presencia de un color dorado en el medio

Imagen 3. Crecimiento bacteriano de mas de 100 colonias en agar sangre.

MEDIO DE CULTIVO

RESULTADO

Gelosa Sangre

Positivo

Sal y Manitol

Positivo

Aggar Biggy

Negativo

Mac Conkey

Negativo

Resultados.Paciente: Adolfo Rivera (elaborado por Raul Del Callejo)

Traumatología

MORFOLOGÍA COLONIAL EN EL MEDIO DE GELOSA SANGRE

  • Forma de colonia: puntiforme
  • Bordes: enteros
  • Elevación: Convexa
  • Superficie: lisa
  • Consistencia: cremosa
  • Color: Beige

Imagen 4. Crecimiento bacteriano de mas de 100 colonias en Sal y manitol.

Imagen 5. Cocos Gram(+).

Imagen 7. Resultados del antibiograma.

Traumatología

Ampicilina

Sensible

Cefalotina

Sensible

Cefotaxima

Sensible

Levofloxacina

Sensible

Cefuroxima

Sensible

Dicloxacilina

Resistente

Eritromicina

Sensible

Gentamicina

Poco Sensible

Cefepime

Resistente

Penicilina

Sensible

Tetraciclina

Poco Sensible

Trimetoprim-Sulfametoxazol

 

Sensible

Imagen 6. Prueba de coagulasa positiva, se muestra un coagulo en el fondo.

Conclusiones.

 

Durante la asistencia a un hospital al área de Traumatología se pueden correr varios riesgos como la contracción de algunas bacterias por una mala limpieza de los instrumentos medicos que se utilizan, en este caso nuestro paciente se le encontro Staphylococcus aureus, la cual es una bacteria demasiado presente en los instrumentos mal lavados que se utilizan en los hospitales para cirugias u otros tratamientos que se aprovechan y entran a nuestro organismo, esta determinación se confirmo al 100% con la prueba de coagulasa realizada en los estudios y con la siembra en Sal y Manitol por colorar de un tono amarillo al medio que es característico de esta bacteria.

 

Bibliografía.

Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. "Diagnóstico Microbiológico". 5ª ed. Ed. Médica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999.

Mims CA, Playfair JHL, Roitt IM, Wakelin D, Willians R. "Microbiologia Médica". 2ª ed. Ed. Harcourt Brace. Madrid, 1999.

Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS, Pfaller MA. "Microbiologia Médica". 4ª ed. Ed. Mosby. Elsevier Science. Madrid, 2002.

Walker T.S. "Microbiologia". Ed. McGraw-Hill Interamericana. Mexico D.F., 2000.

 

Traumatología

 

Se realizo la prueba de Novobiocina y Bacitracina, dando como resultado que es Sensible a la Novobiocina y Resistente a la Bacitracina.

 

Resultados.Paciente: Jose Perez Suarez (elaborado por Alcantar Yolanda)

 

AGAR SANGRE

FORMA DE COLONIA

PUNTIFORME

BORDES

ONDULADO

ELEVACION DE LA COLONIA

CONVEXA

SUPERFICIE

LISA

CONSISTENCIA

CREMOSA

COLOR

BEIGE

                                     AGAR  MAC CONKEY

FORMA DE COLONIA

CIRCULAR

BORDES

ENTERO

ELEVACION DE LA COLONIA

PLANA

SUPERFICIE

LISA

CONSISTENCIA

CREMOSA

COLOR

ROSA

 

 

 

 

 

 

 

 

Imagen 8. Agar McConkey con crecimiento bacteriano significativo.

Traumatología

 

RESULTADOS OBTENIDOS EN LAS BIOQUIMICAS

TSI

PICADURA ESTRÍA SUPERIOR

COLOR INICIAL

NARANJA

COLOR FINAL

 

GLUCOSA, SACAROSA, LACTOSA

POSITIVO

GAS

NEGATIVO

ACIDO SILFHIDRICO

NEGATIVO

 

LIA

PICADURA ESTRÍA SUPERIOR

COLOR INICIAL

MORADO

DESAMINACION DE LICINA

POSITIVO

PRODUCCION DE ACIDO SULFURICO

NEGATIVO

 

MIO

PICADURA

COLOR INICIAL

CAFE

MOVILIDAD

POSITIVO

ORNITINA (REACTIVO DE KVAKS)

POSITIVO

INDOL

POSITIVO

 

Imagen 9. Pruebas bioquímicas con sus respectivos resultados.

Traumatología

Conclusiones.

 

Puede causar infecciones serias en los pulmones, la sangre y el cerebro, puede causar infecciones del tracto urinario y en heridas, además puede propagarse por medio de contacto directo y podría encontrarse en la piel o en la comida, el agua o en la tierra, también puede en hospitales. La Acinetobacter Baumannii es altamente contagiosa, y  haciendo referencia a los resultados que obtuvimos en el laboratorio después de haber realizada las pruebas necesario logramos detectar que la muestra otorgada por la profesora proveniente del hospital de traumatología es la Acinobacter Baumanni por cumplir con todas y cada una de las características necesarias para que sea dicha bacteria.

 

 

ANTIBIOGRAMA

FEP

RESISTENTE

CF

RESISTENTE

CTX

RESISTENTE

SXT

RESISTENTE

AM

RESISTENTE

CRO

RESISTENTE

NF

2.2 CM.

LEV

RESISTENTE

AK

2.3 CM.

GE

RESISTENTE

CL

2 CM

NET

1.6 CM

 

 

Traumatología

 

OXIDASA

CATALASA

AGAR SANGRE

NEGATIVA

POSITIVA

AGAR MAC CONKEY

NEGATIVA

POSITIVA

Imagen 10. Pruebas de catalasa y oxidasa.

 

La infección del torrente sanguíneo o bacteriemia, constituye un cuadro clínico grave con una incidencia en Chile de 1,8 /1000 egresos hospitalarios. Sin embargo existe un porcentaje de sub-notificación importante. Actualmente no se la considera una enfermedad de notificación obligatoria.  El hemocultivo o cultivo microbiológico de la sangre constituye en los casos de septicemia, el único examen que permite su confirmación. Se define como hemocultivo al cultivo microbiológico de una muestra de sangre obtenida por una punción independiente.  En el último tiempo han ocurrido varios cambios, tales como el aumento del número de pacientes inmunocomprometidos, la necesidad de aislar microorganismos no habituales y el advenimiento de sistemas automatizados para  los hemocultivos. Es por ello que es importante revisar algunos aspectos como: Indicación de los hemocultivos, clasificación de estos, toma de la muestra (momento de la obtención, número de hemocultivos, volumen de sangre), diferenciación de bacteriemia versus contaminación, sangre por catéter versus punción periférica, utilidad de los hemocultivos anaeróbicos, utilidad de los hemocultivos con resinas, microorganismos especiales, sistemas de hemocultivos e impacto de la automatización e interpretación de los resultados obtenidos. 
 

 

Hemocultivo

Imagen 1. Cuadro en donde se indican los diferentes tipos de hemocultivos que se realizan para la determinación de distintas pruebas.

Metodología.

 

1.- Tomar la muestra sanguínea y colocar una gota de la misma con jeringa en cada uno de los diferentes agares.

2.- Sembrar en Agar sangre, McConkey, Chocololate y ChromAgar por estría cruzada.

3.- Incububar a 37 C por 24 horas

4.- Observar crecimiento bacteriano.

5.- Observar morfología macroscópica y microscópica.

6.- Realizar frotis, tinción de Gram y observar al microscopio.

8.- Realizar las pruebas que se nos indique con la determinación de la bacteria.

Objetivo.

- Identificar por medio de siembra en diferentes agares, la aplicación de pruebas bioquímicas si lo requiere y la aplicación de antibiogramas la bacteria que se nos fue entregada en un medio de transporte desconociendo todo solo se tenia como unico dato que la muestra provenia de un Hemocultivo (muestra de sangre).

Hemocultivo

Imagen 2. Medios de transporte utilizados para la contención y observación de la muestra sanguínea para un Hemocultivo.

MEDIO DE CULTIVO

RESULTADO

Gelosa Sangre

Positivo

Chocolate

Positivo

Chrom Agar

Positivo

Mac Conkey

Positivo

Resultados.Paciente: Soberanis Contreras Pablo (elaborado por Raul Del Callejo)

Imagen 3. Imagenes ordenadas de izquierda a derecha donde se muestran: Agar sangre con crecimiento bacteriano significativo, crecimiento bacteriano significativo en Agar McConkey y por ultimo crecimiento bacteriano significativo en Agar Chrom.

 

 

 

 

  Medios

 

Características

McConkey

Sangre

Chocolate

Chrom

Forma

irregular

circular

circular

Circular

Borde

redondo

redondo

Redondo

redondo

Elevación

convexa

convexa

convexa

Convexa

Superficie

lisa

Lisa

lisa

Lisa

Consistencia

cremosa

cremosa

cremosa

cremosa

Color

rosa

gris

beige

verde

 

Hemocultivo

Imagen 4. Bacilos cortos aislados Gram(-).

Imagen 6. Antobiograma.

Hemocultivo

 

Amikacina

Sensible

Ampicilina

Resistente

Cefalotina

Resistente

Levofloxacina

Resistente

Cefotaxima

Resistente

Ceftriaxona

Resistente

Clorafenilcol

Resistente

Gentamicina

Poco sensible

Cefepime

Resistente

Netilmicina

Sensible

Nitrofurantoína

Poco sensible

Trimetoprim-Sulfametoxazol

Resistente

 

 

Imagen 5. Tubo izquierdo: prueba de CITRATO positivo, tubo derecho prueba TSI positivo y con presencia de gas, pico ácido y fondo ácido.

Bibliografía.

  • Koneman EW, Allen SD, Janda WM, Schreckenberger PC, Winn WC. "Diagnóstico Microbiológico". 5ª ed. Ed. Médica Panamericana SA. Buenos Aires, 1999.
  • Mims CA, Playfair JHL, Roitt IM, Wakelin D, Willians R. "Microbiologia Médica". 2ª ed. Ed. Harcourt Brace. Madrid, 1999.
  • Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS, Pfaller MA. "Microbiologia Médica". 4ª ed. Ed. Mosby. Elsevier Science. Madrid, 2002.
  • Walker T.S. "Microbiologia". Ed. McGraw-Hill Interamericana. Mexico D.F., 2000.

 

 

 

Conclusiones.

 

Debido a los resultados obtenidos en las pruebas bioquímicas, al crecimiento observado en los difertenes medios de agar que se utilizaron, a la tinción y observación microscópíca se llego al veredicto que la bacteria presentada en este hemocultivo es Klebsiella pneumoniae, la cual segun varias bibliografías consultadas se puede encontrar en torrente sanguíneo debido a que es la manera en la que puede viajar y diseminarse por todo el cuerpo, cabe aclarar que se a observado que esta bacteria se puede encontrar en diversos lugares con poca higiene o se puede encontrar adherido a los alimentos mal tratados.

 

Hemocultivo

Resultados.Paciente: Vera Lopez Isidro (elaborado por Yolanda Alcantar)

 

MORFOLOGIA COLONIAL

AGAR MAC CONKEY

COLOR

CREMA

CONSISTENCIA

CREMOSA

FORMA DE COLONIA

CIRCULAR

TAMAÑO

PEQUEÑO 1-2 mm

BORDES

REDONDOS/ DEFINIDOS

ELEVACION DE LA COLONIA

CONVEXA

AGAR CHROM

COLOR

BEIGE

CONSISTENCIA

CREMOSA

FORMA DE COLONIA

CIRCULAR

TAMAÑO

PQUEÑO 1 mm

BORDES

REDONDO

ELEVACION DE LA COLONIA

CONVEXA

AGAR SANGRE

COLOR

BLANCO

CONSISTENCIA

CREMOSA

FORMA DE COLONIA

CIRCULAR

TAMAÑO

PEQUEÑO 1-2 mm

BORDES

REDONDO

ELEVACION DE LA COLONIA

CONVEXA

AGAR GELOSA CHOCOLATE

NO PRESENTO CRECIMIENTO

 

Hemocultivo

Imagen 8. Antobiograma.

RESULTADOS OBTENIDOS EN LAS BIOQUIMICAS

TSI

PICADURA ESTRÍA SUPERIOR

COLOR INICIAL

NARANJA

COLOR FINAL

 

GLUCOSA, SACAROSA, LACTOSA

POSITIVA / SI FERMENTA

GAS

POSITIVA

ACIDO SULFHIDRICO

POSITIVA

 

LIA

PICADURA ESTRÍA SUPERIOR

COLOR INICIAL

MORADO

DESAMINACION DE LICINA

 

PRODUCCION DE ACIDO SULFURICO

NEGATIVO

 

MIO

PICADURA

COLOR INICIAL

CAFE

MOVILIDAD

POSITIVA

ORNITINA (REACTIVO DE VROGES PROSKAVER)

NEGATIVA

INDOL

POSITIVO

 

Hemocultivo

 

ANTIBIOGRAMA

FEP

SENSIBLE

CF

RESISTENTE

CTX

SENSIBLE

SXT

SENCIBLE

AM

INTERMEDIO

CRO

SENSIBLE

NF

INTERMEDIO

LEV

SENSIBLE

AK

SENSIBLE

GE

SENSIBLE

CL

INTERMEDIO

NET

INTERMEDIO

 

 

Imagen 7. Resultado de las pruebas bioquímicas.

Conclusiones.

 

ESCHERICHIA COLI: Bacilo corto Gram negativo, de la familia enterobacteriaceae, existe como comensal en el intestino humano y de animales, pero también hay cepas patógenas que provocan diarreas.

Es una de las especies bacteriana más común de la microbiota intestinal, se presenta como un comensal en el intestino humano poco tiempo después del nacimiento. Es necesaria junto con otras bacterias para el correcto funcionamiento digestivo, además de producir vitaminas B y K, su tamaño promedio es de 0.5 µ de ancho y 3 µ de largo, son bacterias móviles, no esporuladas, fermenta la glucosa  y lactosa, es catalasa positiva y oxidasa  negativa, reduce nitratos a nitritos

Esta bacteria es la causante de diarrea aguda, enfermedad intestinal infecciona y autolimitada, son evacuaciones liquidas o de consistencia disminuida.

Por la información anterior y por los resultados obtenidos identificamos que la muestra que nos fue entregada corresponde a la bacteria Escherichia Coli.

 

 

Hemocultivo

 La tuberculosis es una enfermedad sistémica, crónica, que afecta principalmente al sistema respiratorio; es causada por el complejo de Mycobacterium tuberculosis, y se adquiere principalmente por vía aérea. Es una enfermedad sistémica que afecta principalmente al sistema respiratorio. (Muller et al., 2013).
Aunque se trata principalmente de una enfermedad pulmonar (85%), afecta también a otros órganos y tejidos. Puede ser mortal si el paciente no recibe el tratamiento adecuado. Actualmente, se considera un severo problema de salud pública la presencia de cepas fármacorresistentes.

 

 

 

Imagen 1. Muestra de diferentes formas de identificar a Mycobacterium tuberculosis.

Mycobacterium tuberculosis

Metodología. para tinción de Ziehl-Neelsen.

 

1.- Adicionar el colorante Fuscina fenolada y contar 3 minutos en la laminilla con muestra (evitar que la muestra llegue a ebullición, cada que se vea que esta a punto retirar la fuente de calor).

2.-Enjuagar con agua.

3.- Quitar exceso y adicionar alcohol-acetona por 3 minutos.

4.- Enjuagar y adicionar azul de metileno.

5.- Enjuagar, secar y leer al microscópio.

Objetivo.

- Conocer el fundamento de la técnica de tinción para la bacteria de Mycobacterium tuberculosis, saber como realizarla de manera correcta y como sembrar en un medio específico para está que en este caso es Lowenstein-Jensen

Imagen 2. Se observa teñido de color rosa palido la presencia de Mycobacterium tuberculosis. Elaborado con tinción de Ziehl-Neelsen observado a 100x.

Mycobacterium tuberculosis

Imagen 3. Medio de cultivo de Lowenstein-Jensen en el que se observa crecimiento de Mycobacterium tuberculosis. Este medio se dejo reposar durante 4 semanas para observar un crecimeinto adecuado.

Mycobacterium tuberculosis

 

El medio de cultivo específico para diagnóstico de tuberculósis es el concido como Lowentein-Jensen, el cual:

1.- Se deja incubar a una temperatura de 37 C

2.- Esperar aproximadamente 4 semanas para observar el crecimiento de tuberculosis.

3.- En laboratorios especializados se realiza una serotipificación.