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Bacteriología

 

Diagnóstica

Elaborado por: Olvera Martínez María Damayanti y Rangel García Brian

Volumen 1, Número 1, Septiembre, 2016

Imágen suminstrada por: fineartamerica.com

Urocultivo

Para evaluar la presencia de bacterias Gram negativas en la orina se considera que las bacterias provenientes de la vejiga o de las porciones superiores aparato urinaria alcanzan una población superior a 100, 000 UFC/mL, cuentas menores a esta cifra podrían

 

Introducción

Un Urocultivo consiste en realizar un cultivo de orina con la finalidad de identificar el germen causal de una

infección de las vías urinarias (IVU) conocida como bacteriuria. Estas ocurren con mayor frecuencia en las

mujeres por razones anatómicas como son la cercanía de la uretra con la vagina y el ano, así como el hecho

de que al ser la uretra femenina más corta resulta más fácil que las bacterias accedan por esta vía al

sistema urinario. El urocultivo debe ser solicitado ante la sospecha de una infección urinaria, tanto baja

como ocurre en el caso de las uretritis y cistitis, como alta ante la sospecha de una pielonefritis,

algunos de los síntomas que se presentan son: ardor al orinar (disuria), formación excesiva de orina

(poliuiria), dolor púbico y de espalda, orina turbia, fiebre y náuseas. (Wein, 2007)

Las infecciones de las vías urinarias más habituales son las producidas por bacterias, aunque también pueden presentarse a causa de virus, hongos o parásitos. Las IVU son causadas generalmente el 80% por Escherichia coli. (Prieto, 2006) 

Las bacterias que se aislan de la orina son Escherichia coli, Klebsiella spp, Proteus sppStaphylococcus saprophyticus, Enterococcus faecalis, entre otros.

Ocasionalmente se puede encontrar Candida albicans, Neisseria gonorrhoeae y Haemophis influenzae. En ocasiones se ha llegado ha encontrar a Staphyloccocus aureus y a Gardnerella vaginalis. La presencia de Lactobacillus y Corynebacterium se consideran como microbiota contaminante de uretra, vagina y heces. (Bacteriología Médica, 2007)

En pacientes pediátricos hospitalizados que desarrollan infección intrahospitalaria se aislan micrrorganismos como: Escherichia coli, Klebsiella spp, Enterobacter spp, Pseudomonas spp y Enterococcus spp. En cambio, en adultos hospitalizados se aislan: Escherichia coli, Staphylococcus epidermis, Klebsiella sp, Enterobacter sp y Pseudomonas aeruginosa, asi como Candida tropicalis y albicans.

Para realizar un urocultivo es necesario el uso de diferentes medios de cultivo que permitan el crecimiento de los microorganismos posibles, como lo es el Agar sangre, el cual es útil tanto para el aislamiento y cultivo de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran variedad de muestras, como para la observación de reacciones de hemólisis y el Agar CLED se utiliza para la diferenciación de bacterias fermentadoras de la lactosa o las no fermentadoras, este medio de cultivo tiene un indicador de pH que es Azul de Bromotimol, si el microorganismo fermenta la lactosa el pH del medio disminuye y el indicador vira a amarillo. Es comúnmente utilizado para el crecimiento de enterobacterias y bacilos Gram – presentes en las orinas patológicas. (Strasinger, 2008) 

 

 

 

 

 

Conclusiones

No hubo crecimiento bacteriano debido a que la persona se encontraba sana y no padecía de ninguna infección

corresponder a infecciones en las vías superiore en pacientes que han recibido antimicrobianos, o en aquellos en donde la orina está muy diluida por terapia hidratante. En cambio, las bacterias que son arrastradas durante la micción se consideran contaminantes obteniendo cuentas menores a 10, 000 UFC/mL.

El desarrollo de hongos o bacterias con requerimientos nutricionales especiales con cuentas entre 1,000 y 100,000 UFC/mL dan el diagnóstico de IVU. (Kass, 1957 y Sanford (1956)

Bibliografía

- Wein, Alan J. Urología. 9a. Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2007.

- Strasinger, Susan. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5a Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2008.

- Prieto, J.M. La Clínica y el Laboratorio. 20a. Edición. Editorial Elsevier. Barcelona, 2006.

Conclusiones

 

La muestra no presentó crecimiento bacteriano debido a que el paciente al que se le solicitó la muestra no padecía ninguna infección.

Metodología

 

Obtención de la muestra:

 1. Lavar los genitales usando solo agua y jabón

2. Comenzar a orinar descartando la primera parte y recoger el chorro medio en un vaso esteril y hermético.

3. Etiquetar la muestra correctamente con los datos del paciente

 

 

Urocultivo:

1. Tomar con una asa calibrada de 0.01 la muestra de orina.

2. Realizar un sembrado masivo en los medios de cultivo Agar Sangre y CLED

3. Incubar a 37°C durante 24 horas

Resultados

 

* No hubo crecimiento bacteriano *

Objetivo

Determinar los diferentes tipos microorganismos presentes en la muestra de orina mediante un urocultivo para el diagnostico de una posible infección urinaria

Introducción

 

La vaginitis bacteriana es la causa más frecuente de exudado vaginal y de mal olor de vagina. La VB es una alteración de la flora vaginal, en la que la flora bacteriana normal, constituida por bacilos grampositivos (Lactobacillus spp.), se halla sustituida por cocobacilos gramnegativos (Gardnerella vaginalis) y una flora variada que comprende diversas especies anaerobias. En su patogé- nesis intervienen sinérgicamente G. vaginalis y los anaerobios que producen el mal olor. La causa de esta disbacteriosis es desconocida, y se asocia con la existencia de múltiples parejas sexuales, duchas vaginales y pérdida de Lactobacillus, lo que provoca una elevación del pH vaginal. En realidad no está establecido de una forma clara que la VB se produzca por la adquisición de un patógeno de transmisión sexual. El tratamiento de las parejas no resulta eficaz para prevenir las recidivas

Todas las infecciones del aparato genital femenino presentan una sintomatología que puede ser común, como disuria, polaquiuria, prurito vulvar, dispareunia y leucorrea.

La flora vaginal naturalmente contiene bacterias como los lactobacilos o la flora de Döderlein. Pero tan pronto como hay una infección, esto se traduce en un aumento del número de los leucocitos que son la mayoría de las veces polinucleares neutrófilos. 

Si existe un desequilibrio, se procede a hacer un cultivo para determinar la bacteria responsable de la infección. 

En caso de presencia de Neisseria gonorrhoeae y Chlamydia trachomatis, se trata de una endocervicitis. 

Si se detecta el germen Trichomonas vaginalis, se trata de una infección vaginal. 

Un aumento de Gardnerella vaginalis, micoplasmas (Mycoplasma hominis), y el hallazgo de especies de Mobiluncus y gérmenes anaeróbicos están asociadas con la vaginosis bacteriana. 

Por otra parte, la vaginitis bacteriana está relacionada con la presencia de la bacteria Staphylococcus aureus, la micosis vaginal con el hongo Candida albicans, y una infección parasitológica por la detección de los microorganismos Trichomonas y Actinomyces

Cultivo endocervical

Resultados

 

Morfología macroscopica de la colonia obtenida del medio Agar Sangre

 

Objetivo

 

Realizar la determinación de los diferentes microorganismos presentes en una muestra de flujo vaginal mediante una siembra en medios de cultivo para diagnosticar una posible infección bacteriana

Tamaño

Puntiforme

 Color Blanquecina 
Forma Circular
Elevación Convexa
Borde Entero
Aspecto Cremosa
Hemolisis No presentó

 

Metodología

 

1.- Recolectar una muestra de exudado vaginal con ayuda de un hisopo estéril y colocar en medio de transporte.

2.-Etiquetar la muestra con datos del paciente.

3.-Sembrar en medios de cultivo sangre, chocolate y Biggy por medio de estria cruzada.

4.-Incubar a 37 grados centígrados por 24 horas.

5.-Dejar el medio Biggy se deja a temperatura ambiente durante la aparición de levaduras.

Conclusión

 

La muestra de flujo vaginal presentaba infección por Staphylococcus saprophyticus

Catalasa +
Oxidasa +
Coagulasa -
Bacitracina Resistente
Novobiocina Resistente

 

Morfología microscopica

Arreglo Cocos
Gram Positivo

 

Metabolismo microbiano

Introducción

 

El coprocultivo es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces (materia fecal) que puedan causar enfermedad y síntomas gastrointestinales.

Se necesita una muestra de materia fecal.

La recolección de la muestra se utiliza de las siguientes formas:

  • En una bolsa de plástico. Coloque la bolsa sobre la taza del inodoro de forma tal que se sostenga con el asiento. Luego, se coloca la muestra en un recipiente limpio suministrado por su proveedor de atención médica. 
  • En un equipo para recolección de la muestra que trae una gasa especial que se usa para recogerla. Colóquela en un recipiente limpio suministrado por su proveedor.

No mezcle orina, agua ni papel higiénico con la muestra.

Para los niños que usan pañales:

  • Cubra el pañal con un envoltorio plástico. 
  • Coloque el envoltorio plástico de forma tal que impida que la orina y las heces se mezclen. Esto proporcionará una muestra mejor.

Retorne la muestra al laboratorio lo más pronto posible y no incluya en ella papel higiénico ni orina.

En el laboratorio, un técnico coloca una parte de la muestra en un recipiente especial. Entonces, este recipiente se llena con un gel que estimula la multiplicación de bacterias u otros microorganismos. Si se presenta proliferación de ellos, se identifican los microorganismos. El técnico del laboratorio también puede realizar más exámenes para determinar el mejor tratamiento.

Este examen se realiza cuando el médico sospecha que usted puede tener una infección gastrointestinal. Asimismo, se puede llevar a cabo si usted presenta diarrea intensa que no desaparece o que sigue reapareciendo.

El coprocultivo tiene gran valor en los estudios epidemiológicos; sin embargo, el estudio etiológico de diarrea en todo paciente es cuestionable, ya que la gran mayoría de los episodios son auto limitados (aunque sean bacterianos) y el manejo clínico es independiente de la etiología; lo más importante es la prevención y el manejo de la deshidratación. Desde este punto de vista, el síndrome diarreico producido por Shigella, es de las pocas etiologías que se beneficiarían con un tratamiento antimicrobiano y de estudios de susceptibilidad. Por otra parte, existe controversia respecto del uso de antimicrobianos en cuadros producidos por E. coli Entero Hemorrágica, por un eventual riesgo de desencadenar un Síndrome Hemolítico Urémico.

El coprocultivo es una muestra que por volumen, costo y carga de trabajo, suele ser de bajo rendimiento y bajo costo-efectividad.

Otras bacterias relacionadas con la diarrea es la shigella, Staphylococcus aureus, campilobacter sp. Que pueden ocasionar diferentes patologías, y para su identificación se utilizan medios específicos y pruebas bioquímicas para cada bacteria.

Coprocultivo

Metodología 

 

  1. Recolectar una muestra de heces fecales con ayuda de un hisopo estéril y colocar en medio de transporte.
  2. Etiquetar la muestra con datos del paciente.
  3. Sembrar en medios de cultivo como Sal y Maniol, Mac Conkey, EMB, Verde brillante, Caldo tetrationato, por medio de estriar cruzada, esterilizando en cada una de las estrias.
  4. Incubar a 37 grados centígrados por 24 horas

*En el caso de que haya creciemineto en el medio de Sal y Manitol y un color rojizo en el Caldo tetrationato, realizar pruebas bioquímicas como TSI, MIO, LIA, Citrato de Simmons y Caldo Urea.

 

Resultados

 

No hubo presencia de bacterias patologicas, solo microbiota normal.

 

Objetivo

 

Realizar la determinación de los diferentes microorganismos presentes en una muestra de materia fecal mediante una siembra en medios de cultivo para diagnosticar una posible infección bacteriana

Conclusiones

 

La muestra de materia fecal presentaba microbiota normal (Escherichia coli ) por lo que el resultado se reporta como negativo

El exudado faríngeo o frotis faríngeo es una prueba de laboratorio que se realiza para aislar e identificar microorganismos que puedan causar una infección en la garganta.

Se realiza utilizando un hisopo especial que se introduce por la boca y permite tomar una muestra de secreciones tomadas de la pared posterior de la garganta, mismas que se colocan en un plato especial (cultivo) que permite el crecimiento de las bacterias.

Este examen se realiza para determinar las causas de alguna infección de nariz y garganta que no responde adecuadamente al tratamiento. Con frecuencia, este tipo de afecciones se deben a un virus, pero el cultivo permite determinar cuándo se debe a una bacteria (principalmente estreptococo).

Cabe señalar que un cultivo de este tipo también puede hacerse con prueba de antibiograma, la cual le ayuda al médico a determinar qué antibióticos funcionarán mejor en el tratamiento.

Las manifestaciones clínicas pueden variar desde dolor de garganta y odinofagia moderados, con escasa repercusión sobre el estado general, hasta molestias locales importantes acompañadas de fiebre. El dolor puede irradiar al oído y aumentar con los movimientos del cuello. El examen de la faringe muestra una mucosa hiperémica con las amígdalas aumentadas de tamaño y, en ocasiones, recubiertas de exudado purulento.

Las bacterias que se encuentran en una patología en la faringe son las siguientes:

 

Estreptococo betahemolítico del grupo A (EBHGA) y, probablemente, de los grupos C y G
Corynebacterium diphtheriae 
Arcanobacterium haemolyticum 
Chlamydia pneumoniae 
Mycoplasma pneumoniae 
Neisseria gonorrhoeae 
Treponema pallidum Yersinia enterocolitica 
Infección mixta por microrganismos anaerobios de la flora orofaríngea y espiroquetas (angina de Vincent) 
Fusobacterium necrophorum 

 

Ante una faringitis infecciosa con mucha fiebre y malestar se debe de hacer un cultivo de exudado faríngeo (frotis), para realizar un estudio de la bacteria causante.
Además, es necesario realizar un análisis de sangre para ver la velocidad de sedimentación globular VSG que puede estar muy elevada.

Otro parámetro significativo es la medición de antiestreptolisinas ó ASLO al realizar un análisis de sangre. La presencia de títulos altos de antiestreptolisinas ó ASLO, indican una infección por la bacteria Estreptococo betahemolíticos del tipo A, que puede producir una glomerulonefritis, una fiebre reumática, una endocarditis bacteriana o una escarlatina.

Cultivo faringeo

Morfología microscopica

Resultados

 

Morfología macroscopica de la colonia obtenida del medio Agar Sangre

Objetivo

 

Realizar la determinación de los diferentes microorganismos presentes en una muestra de exudado faríngeo mediante una siembra en medios de cultivo y pruebas bioquímicas  para diagnosticar una posible infección bacteriana

Metodología 

 

1.- La muestra debe ser recolectada en ayunas, sin aseo bucal, sin antibióticos durante 7 días.

2.- Recolectar una muestra de exudado faríngeo con ayuda de un hisopo estéril y colocar en medio de transporte Stuart.

3.- Etiquetar la muestra con datos del paciente.

4.- Sembrar en medios de cultivo como gelosa sangre, gelosa chocolate, agar sal y manitol, Mac Conkey y EMB por medio de estria cruzada

5.- Incubar a 37 grados centígrados por 24 horas.

Arreglo Bacilos
Gram Negativo
Tamaño

1mm

 Color Blanquecina 
Forma Circular
Elevación Convexa
Borde Entero
Aspecto Cremosa
Hemolisis Si hubo

 

 

 

Conclusión

 

La muestra de exudado faríngeo presentaba  infección por Enterobacter cloacae, debido a que la persona a la que se le tomó la muestra se encontraba inmunosuprimida, debido a que padecía de VIH-SIDA

Antibiograma

 

Amikacina: Sensible                     Cloranfenicol: Sensible

Ampicilina: Resistente                  Gentamicina: Sensible

Cefepime: Sensible                       Netilmicina: Sensible

Cefalotina: Sensible                      Nitrofurantoína: Sensible

Cefotaxima: Sensible                    Levofloxacina: Sensible

Ceftriaxona: Sensible                    Trimetoprim-sulfametoxazol: Sensible

 

 

Metabolismo microbiano

Catalasa +
Oxidasa -
Coagulasa -
TSI K/A 
Producción de gas

+

LIA K/K
Movilidad +
Ornitina +
Indol -
Citrato +

 

Cultivo expectoración

 Introducción

 

Es un examen de laboratorio que busca microbios que causan infección. El esputo es el material que sale de las vías respiratorias cuando usted tose profundamente

 

Se necesita una muestra de esputo. La muestra se toma pidiéndole al paciente que tosa profundamente y que escupa cualquier flema que provenga de sus pulmones en un recipiente especial. La muestra se coloca en un medio de transporte y posteriormente se realiza un sembrado y luego se observa para ver si hay proliferación de bacterias u otros microbios patógenos.

 

En las enfermedades infecciosas de localización broncopulmonar se encuentran en el esputo muchos gérmenes: estreptococos-estafilococos, Pseudomonas, neumococos, Klebsiella pneumoniae (neumobacilos de Friedländer), Bacteroides, micrococcus catarralis, Hemophilus (Pfeiffer), cocobacilo de la tos ferina (Bordet), etc.

 

El principal interés de la investigación bacteriológica está en las neumonías (Klebsiella o Mycoplasma, neumococo, Legionella, solos o asociado al estreptococo); en la bronconeumonía gripal (a veces, sólo estreptococos); en la gripe (Hemophilus influenzae, no causal de ésta sino de otras neumonitis); en la tos ferina (muy constante). Es importante excluir la contaminación del esputo por la saliva con flora bucal saprofita y tener en cuenta que sólo la presencia masiva de un tipo determinado de bacteria autoriza a concederle valor etiológico.

 

El hallazgo del bacilo de Koch en los esputos es de importancia capital. Sólo este hallazgo o su ausencia permite diferenciar, a veces, la tuberculosis pulmonar de otros estados con síndrome absolutamente idéntico, como condensaciones postgripales, neumoconiosis, micosis, localizaciones pulmonares de la sarcoidosis, neumonía atípica, de la sífilis, etc. Se investiga por observación directa en frottis del esputo: muchas veces basta. Si el resultado es negativo, y clínicamente se sospecha, no obstante, la naturaleza tuberculosa, puede pensarse que la negatividad sea debida a la rareza de los gérmenes o a su extraordinaria dilución en grandes exudados bronquiales; se recurre entonces a la homogeneización y enriquecimiento del esputo.

Resultados

 

Se obtuvo crecimiento en el medio de Biggy, por lo que se realizó la prueba de tubo germinativo, el cual resultó positivo, caracteristico de Candida albicans.

Metodología

 

  1. Tomar la muestra de esputo pidiéndole al paciente  que tosa profundamente y que escupa cualquier flema que provenga de sus pulmones en un recipiente especial.
  2. Etiquetar la muestra correctamente con los datos del paciente
  3. Realizar un sembrado por estría cruzada en los medios de cultivo: Mac Conkey, sangre, chocolate y Biggy
  4. Incubar a 37 grados centígrados durante 24 horas
  5. En el medio de cultivo de Biggy incubar a temperatura ambiente durante la aparición de colonias.

*En el caso de haber crecimiento en biggy realizar la prueba de tubo germinativo

Objetivo

Determinar y encontrar los tipos de microorganismos presentes en una muestra de esputo mediante la siembra en medios de cultivo y pruebas bioquímicas para el diagnóstico de una posible infección patológica

Conclusión

 

Se realizó la determinación de microorganismos en una muestra de esputo donde se encontraron micrococos como microbiota normal, y en el medio de cultivo Biggy se encontraron levaduras 

Introducción

 

La traumatología es la rama de la medicina que se especializa en los traumatismos y en sus consecuencias. Los expertos en traumatología, conocidos como traumatólogos, estudian las lesiones que se producen en el aparato locomotor.

Pese a que el nombre de esta disciplina alude directamente a los traumas(lesiones generadas por agentes mecánicos), la traumatología también se dedica a otras clases de lesiones y trastornos. De este modo, concentra su atención en todo aquello que puede incidir en el normal funcionamiento del aparato locomotor.

Las ifecciones pueden producirse dentro de la herida quirurgica a cualquier profundidad, desde la piel misma hasta la cavidad mas profunda, esto puede ser contaminacion del ambiente o por el material quirurgico que se haya empleado.

Las bacterias mas comunes en una infeccion de herida son:

Staphylococcus aureus, Enterobacter, Streptococcus epidermidis, Klebsiella, Enterococcus, Escherichia coli, Salmonella, Pseudomonas, Acinetobacter, etc.

La toma de la muestra es el procedimiento mediante el cual se obtiene el tejido o fluido para estudio microbiológico. La calidad de la muestra debe ser confiable, y la interpretación del resultado del estudio microbiológico depende de la calidad de la muestra. 
Se debe preparar el sitio de obtención lavando la herida con suero y por arrastre mecánico. Usar material estéril y técnica aséptica. El volumen de la muestra en general es pequeño; un trozo de tejido puede fluctuar entre 1 y 5 gramos (equivalente al tamaño de una lenteja). La muestra óptima consta de fluidos y tejido. La técnica óptima para tomar fluido es la punción y la aspiración. Si se emplean tórulas, se deben colocar en medio de transporte ya que el cuerpo humano tiene un gran porcentaje de agua, medio en el cual viven bacterias y gérmenes en general; si se envía una tórula seca, los microorganismos se mueren rápidamente. Las tórulas se deben colocar de inmediato en medio de transporte; si no es posible, enviar en tubo estéril con suero fisiológico antes de 30 minutos al laboratorio. 
El cultivo Stuart es un medio de transporte que se utiliza en

muestras que potencialmente contengan gérmenes aerobios.

Una vez tomada la muestra, el tiempo de duración es de 24 horas

a temperatura ambiente. No es necesario otro tipo de medidas

como acercar a calor o frío. 
No se deben tomar muestras de pus ya que éste contiene células

muertas y el líquido acidifica rápidamente, provocando la muerte

de todas las otras bacterias. Por lo tanto, es importante el arrastre

antes de tomar el cultivo. Para el lavado se debe usar un suero

tibio.

Cultivo de Muestra de Trauma

Staphylococcus aureus

 

Medio de Cultivo

Gelosa Sangre

Mac Conkey

Tamaño

1 mm

1 mm

Color

Gris

Verde

Forma

Rizoide

Rizoide

Elevación

Plana

Plana

Superficie

Rugosa

Rugosa

Aspecto

Humeda

Humeda

Borde

Consistencia

Ondulado

Suave

Ondulado

Suave

Hemolisis

Si

-

 

Resultados   MUESTRA 1

             

                Morfología macroscopica                                                    Morfología microscopica

Muestra 1. Bacilos Gram (-)

Objetivos

Determinar los microorganismos presentes en una muestra de herida de paciente del área de Traumatología mediante un análisis microbiológico para el diagnóstico de una posible infección bacteriana 

Muestra 1 en Medio Mac Conkey, las colonias no ferementaron la lactosa y desprendieron un pigmento verde

Metodología

 

1.- Realizar un sembrado con la muestra proporcionada en medio de cultivo Mac Conkey, gelosa sangre, sal y manitol.

2.--Incubar a 37 grados centígrados por 24 horas

3.-Realizar tinción de Gram, prueba de oxidasa, catalasa y pruebas bioquímicas (Dependaran del Gram al que correspondan)

 

Arreglo

Bacilos

Gram

Negativo

Bacteria: Pseudomonas aeruginosa

Metabolismo microbiano

 

Catalasa

+

Oxidasa

+

Coagulasa

-

TSI

K/K

Producción de gas

-

LIA

K/K

Movilidad

+

Ornitina

-

Indol

-

Citrato

+

Resultados   MUESTRA 2

             

         Morfología macroscopica               Morfología microscopica

Conclusión

 

Se realizó la determinación de microorganismos en muestras de traumas, se determinó que en la primer muestra se encontraba Pseudomonas aeruginosa y en la segunda muestra se trataba de Acinetobacter

Medio de Cultivo

Mac Conkey

Tamaño

2 mm

Color

Incolora

Forma

Irregular

Elevación

Plana

Superficie

Rugosa

Aspecto

Humeda

Borde

Enteros

Hemolisis

-

Bacteria: Acinetobacter

Arreglo

Cocobacilos

Gram

Negativo

Muestra 2. Cocobacilos Gram (-)

Bibliografía

- Wein, Alan J. Urología. 9a. Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2007.

- Strasinger, Susan. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5a Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2008.

- Prieto, J.M. La Clínica y el Laboratorio. 20a. Edición. Editorial Elsevier. Barcelona, 2006.

Muestra 2. Medio Mac Conkey

Metabolismo microbiano

 

Catalasa

+

Oxidasa

-

Coagulasa

-

TSI

K/K

Producción de gas

-

LIA

K/K

Movilidad

+

Ornitina

+

Indol

+

Citrato

-

 

Introducción

 

Un hemocultivo es un cultivo microbiológico de la sangre. Es un método diagnóstico empleado para detectar infecciones por bacterias (Bacteriemia) u hongos en la sangre.

 

Por lo menos se toman 10 ml de sangre por venopunción y se inocula en dos frascos que contienen un medio de cultivo específico para organismos aerobios y anaerobios.

 

Se necesita que los frascos no se contaminen con bacterias de la piel de los pacientes o del personal que realiza la extracción. Con ese fin, antes de proceder a la extracción se limpiarán los tapones de los frascos de hemocultivo con un antiséptico que se dejará secar para evitar su entrada en el interior del frasco al inocular la sangre. Se ha demostrado que la introducción de pequeñas cantidades de antiséptico en el frasco puede inhibir el crecimiento bacteriano. A continuación se insertará la aguja en la vena elegida y se extraerá el volumen de sangre sin utilizar anticoagulante. No debe ponerse algodón u otro material no estéril sobre la aguja en el momento de sacarla de la vena.

 

 Los frascos de hemocultivo deben inocularse rápidamente para evitar la coagulación de la sangre en la jeringa, atravesándolos con la aguja en posición vertical. Diferentes estudios demuestran que el cambio de agujas no disminuye la tasa de contaminación y aumenta el riesgo de pinchazo accidental y otros sugieren lo contrario. Se inoculará en primer lugar el frasco anaerobio, evitando la entrada de aire, seguido del aerobio, invirtiéndolos varias veces para mezclar la sangre y el medio de cultivo.

 

Son comunes cuando se sospecha de septicemia, meningitis, o neumonía, los microorganismos más frecuentes son:

 

Cocos Gram positivos:

- Staphylococcus aureus

- Streptococcus pneoumoniae

 

Bacilos Gram negativos:

- Escherichia coli

- Klebsiella pneumoniae

- Pseudomonas aeruginosa 

 

Hemocultivo

Muestra 1 en CHROMagar, colonias verde-azul

Klebsiella

Metodología

1.- Recolectar con una jeringa la muestra de sangre del frasco estéril.

2.- Colocar una gota en el medio de cultivo Mc Conkey, gelosa sangre, sal y manitol y Chromo agar.

3.- Sembrar por el método de estría cruzada en cada uno de los medios de cultivo

4.- Incubar a 37 grados centígrados por 24 horas

5.- Realizar tinción de Gram, prueba de oxidasa, catalasa y pruebas bioquímicas 

6.- Realizar antibiogramas para saber la resistencia y sensibilidad de la bacteria.

Resultados   MUESTRA 1

             

                                                      Morfología macroscopica                                                    

Medio de Cultivo

Gelosa Sangre

Agar Chocolate

Mac Conkey

CHROMagar

Tamaño

2 mm

2 mm

2 mm

2 mm

Color

Blanca

Blanca

Rosa

Verde

Forma

Circular

Circular

Circular

Circular

Elevación

Convexa

Convexa

Convexa

Convexa

Superficie

Lisa

Lisa

Lisa

LIsa

Aspecto

Humeda

Humeda

Humeda

Humeda

Borde

Entero

Entero

Entero

Entero

Consistencia

Suave

Suave

Suave

Suave

Hemolisis

Si

-

-

-

Muestra 1 en medio Mac Conkey, colonias fermentaron la lactosa

Objetivo

Determinar los microorganismos presentes en una muestra de sangre mediante un hemocultivo para el diagnóstico de una posible septicemia.

Morfología microscopica

 

Arreglo

Bacilos

Gram

Negativo

Muestra 1. Bacios Gram (-)

Metabolismo microbiano

 

 

Catalasa

+

Oxidasa

-

Coagulasa

-

TSI

A/A

Producción de gas

+

Citrato

-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Bacteria:Klebsiella pneumoniae

Crecimiento bacteriano de la muestra 2 en el medio Mac Conkey

Conclusión

 

Se realizó la determinación de microorganismos en muestras de sangre, se determinó que en la primer muestra se encontraba Klebsiella pneumoniae y en la segunda muestra se trataba de Escherichia coli. Posteriormente se realizó un antibiograma para identificar a que era resistente y sensible cada una de las bacterias.

Medio de Cultivo

Gelosa Sangre

Mac Conkey

CHROMagar

 

Tamaño

0.1 mm

0.1 mm

0.1 mm

 

Color

Transparente

Blanca

Amarilla

 

Forma

Puntiforme

Puntiforme

Puntiforme

 

Elevación

Plana

Plana

Plana

 

Superficie

Lisa

Lisa

Lisa

 

Aspecto

Humeda

Humeda

Humeda

 

Borde

Entero

Entero

Entero

 

Hemolisis

-

-

-

 

 

 

 

 

 

 

Resultados   MUESTRA 2

             

                             Morfología macroscopica                                     

Muestra 2 en CHROMagar, colonias amarillas 

Crecimiento bacteriano de la muestra 2 en Gelosa Sangre

Fármaco

Muestra 1

Muestra 2

Amikacina

S

S

Ampicilina

R

I

Cefepime

I

S

Cefalotina

R

R

Cefotaxima

R

S

Ceftriaxona

R

S

Cloranfenicol

R

I

Gentamicina

I

S

Netilmicina

S

I

Nitrofurantoína

S

R

Levofloxacina

I

I

Trimetoprim-Sulfametoxazol

R

R

 

Antibiogramas

Morfología microscopica

 

Arreglo

Bacilos cortos

Gram

Negativo

Metabolismo microbiano

 

Catalasa

+

Oxidasa

-

Coagulasa

-

TSI

K/K

Producción de gas

-

LIA

K/K

Citrato

+

 

 

 

 

 

 

 

Bacteria: Escherichia coli

La tuberculosis es causada por Mycobacterium tuberculosis, una bacteria que casi siempre afecta a los pulmones. Se trata de una afección curable y que se puede prevenir.

 

La infección se transmite de persona a persona a través del aire. Cuando un enfermo de tuberculosis pulmonar tose, estornuda o escupe, expulsa bacilos tuberculosos al aire. Basta con que una persona inhale unos pocos bacilos para quedar infectada.

 

Se calcula que una tercera parte de la población mundial tiene tuberculosis latente, término este aplicado a las personas infectadas por el bacilo pero que aún no han enfermado ni pueden transmitir la infección.

 

Las personas infectadas con el bacilo tuberculoso tienen un riesgo a lo largo de la vida de enfermar de tuberculosis de un 10%. En cambio, las personas inmunodeprimidas, por ejemplo las que padecen VIH, desnutrición o diabetes, y los consumidores de tabaco corren un riesgo mucho mayor de enfermar.

 

Cuando alguien desarrolla tuberculosis activa, los síntomas (tos, fiebre, sudores nocturnos, pérdida de peso, etc.) pueden ser leves durante muchos meses. Esto puede hacer que la persona afectada tarde en buscar atención médica, con en consiguiente riesgo de que la bacteria se transmita a otros sujetos. Una persona con tuberculosis activa puede infectar a lo largo de un año a entre 10 y 15 personas por contacto directo. Sin no se proporciona un tratamiento adecuado, morirán sobre el 45% de las personas VIH-negativas con tuberculosis y la práctica totalidad de las personas con coinfección tuberculosis/VIH.

 

Los síntomas comunes de la tuberculosis pulmonar

activa son tos productiva (a veces con sangre en el

esputo), dolores torácicos, debilidad, pérdida de peso,

fiebre y sudores nocturnos. Son muchos los países que

siguen dependiendo para diagnosticar la tuberculosis

de la baciloscopia de esputo, una prueba que viene

utilizándose desde hace mucho tiempo. Este método

consiste en el examen microscópico de muestras de

esputo por técnicos de laboratorio para detectar la

presencia de la bacteria de la tuberculosis. Sin embargo,

la microscopía solo detecta la mitad de los casos de

tuberculosis y es incapaz de determinar si hay

farmacorresistencia.

Tuberculosis

Metodología 

 

    Siembra de expectoración

1. Inocular aproximadamente 0,5 ml por tubo sobre la superficie del medio de cultivo, rotar los tubos para lograr una distribución homogénea de la muestra.

2. Incubar bajo condiciones aerobias, a 35-37°C. incubar los tubos con las tapas flojas, inclinados 5º aproximadamente en bandeja adaptada con varilla de vidrio y extremos ajustados con tubos de goma. 

3. Observar los cultivos dos veces por semana y registrar el tiempo de aparición de las colonias.

 

    Tinción de Ziehl-Neelsen

1. Coloración especifica: Se cubre el frotis con fucsina fenicada. Se calienta por debajo de la lámina con un hisopo impregnado de alcohol encendido hasta que se observe la emisión de vapores blancos; retirar la fuente de calor, repetir dos veces más la misma operación; cuidar que el colorante no se derrame, no se seque o hierva. Si esto ocurre, agregar más fucsina a la preparación. El tiempo de contacto con la fucsina debe ser entre 5 y 10 minutos.

2. Decoloración: decolorar con alcohol ácido alternando con lavados suaves de agua fría (el agua tibia desprende los extendidos). Esta operación se repetir las veces que sea necesario hasta que las partes menos espesas queden incoloras.

3. Coloración de fondo: Se cubren los extendidos con azul de metileno por 30 segundos como mínimo. Se lava con agua corriente suavemente. Se limpia con algodón impregnado en alcohol por debajo de la lámina. Se secan las preparaciones a temperatura ambiente sobre un papel absorbente y limpio. 

 

    Lectura

1. La observación microscópica se hace con lente de inmersión y ocular 8 a 10x.

2. Se debe leer un mínimo de cinco zonas que sean representativas del extendido y un mínimo de 100 campos útiles.

3. Al cambiar la lámina se debe limpiar cuidadosamente el aceite adherido al lente de inmersión, con un papel seco y suave, especialmente si ésta ha sido positiva. 

 

 

Mycobacterium tuberculosis

Objetivo

Llevar a cabo el aislamiento de Mycobacterium tuberculosis de una muestra de expectoración, con el fin de realizar el protocolo correcto para la identificación de esta bacteria.

Conclusión

 

Se realizó la determinación de microorganismos en una muestra de expectoración, identificando al agente causal como Mycobacterium tuberculosis.

Realización de la Tinción Ziehl-Neelsen para la identifcación de Bacilos Ácido-Alcohol Resistente.

Resultados

Medio de Cultivo

Lowenstein Jensen

Tamaño

1 mm

Color

Amarilla

Forma

Granular

Elevación

Pulvinada

Superficie

Rugosa

Aspecto

Seco

Borde

Consistencia

 Ondulada

Poroza

Hemolisis

-

Bibliografía

- Wein, Alan J. Urología. 9a. Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2007.

- Strasinger, Susan. Analisis de orina y de los líquidos corporales. 5a Edición. Editorial Médica Panamericana. España, 2008.

- Prieto, J.M. La Clínica y el Laboratorio. 20a. Edición. Editorial Elsevier. Barcelona, 2006.

Bacilo Ácido-Alcohol Resitente (BAAR). Tinción de Ziehl-Neelsen.

Crecimiento de Mycobacterium tuberculosis en el medio Lowenstein Jensen